下面我們來看看紫外分光光度計的運行原理是什么吧。
物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)吸收(shou)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜本質(zhi)(zhi)(zhi)上就(jiu)(jiu)是(shi)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)中的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)子(zi)(zi)和(he)原(yuan)子(zi)(zi)吸收(shou)了入射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)中的(de)(de)(de)(de)(de)某些特定波(bo)長的(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)能量(liang),相應地(di)發(fa)生了分(fen)(fen)子(zi)(zi)振動能級躍遷(qian)(qian)和(he)電子(zi)(zi)能級躍遷(qian)(qian)的(de)(de)(de)(de)(de)結(jie)果。由(you)于(yu)各種物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)具有(you)各自不同的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)子(zi)(zi)、原(yuan)子(zi)(zi)和(he)不同的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)子(zi)(zi)空間結(jie)構,其吸收(shou)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)能量(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)情況(kuang)也就(jiu)(jiu)不會相同。因此,每種物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)就(jiu)(jiu)有(you)其*的(de)(de)(de)(de)(de)、固定的(de)(de)(de)(de)(de)吸收(shou)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜曲線,可根據吸收(shou)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜上的(de)(de)(de)(de)(de)某些特征波(bo)長處的(de)(de)(de)(de)(de)吸光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)度的(de)(de)(de)(de)(de)高低判別或(huo)測定該物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)含量(liang),這就(jiu)(jiu)是(shi)分(fen)(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)度定性和(he)定量(liang)分(fen)(fen)析(xi)的(de)(de)(de)(de)(de)基礎(chu)。分(fen)(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)度分(fen)(fen)析(xi)就(jiu)(jiu)是(shi)根據物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)吸收(shou)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜研究物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)成分(fen)(fen)、結(jie)構和(he)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)間相互作(zuo)用(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)有(you)效手(shou)段。
又因為許多物質在紫(zi)(zi)外(wai)(wai)-可見(jian)光(guang)(guang)區有特(te)征吸收峰,所以可用紫(zi)(zi)外(wai)(wai)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度法(fa)對這些物質分別進(jin)行測定(ding)(定(ding)量分析和定(ding)性分析)。紫(zi)(zi)外(wai)(wai)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度法(fa)使用基于朗伯-比耳定(ding)律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長一定時,溶液的吸光度A是吸光物質的濃度C及吸收介質厚度l(吸收光程)的函數。
先(xian)確定實驗條件,并在(zai)(zai)此(ci)條件下測(ce)得標(biao)(biao)準物(wu)(wu)質的(de)(de)(de)吸(xi)收峰以(yi)及(ji)其對(dui)應(ying)波長值(zhi)(同時可(ke)獲(huo)得該物(wu)(wu)質的(de)(de)(de)大吸(xi)收波長);再在(zai)(zai)選定的(de)(de)(de)波長范圍內(或大波長值(zhi)處),分別以(yi)(不同濃度)標(biao)(biao)準溶液(ye)(ye)的(de)(de)(de)吸(xi)光(guang)度和溶液(ye)(ye)濃度為橫、縱(zong)坐標(biao)(biao)繪出化合物(wu)(wu)溶液(ye)(ye)的(de)(de)(de)標(biao)(biao)準曲(qu)線得到其所對(dui)應(ying)的(de)(de)(de)數學方程;接著在(zai)(zai)相同實驗條件下配制待(dai)測(ce)溶液(ye)(ye),測(ce)得待(dai)測(ce)溶液(ye)(ye)的(de)(de)(de)吸(xi)光(guang)度,后(hou)用(yong)已獲(huo)得的(de)(de)(de)標(biao)(biao)準曲(qu)線方程求(qiu)出待(dai)測(ce)溶液(ye)(ye)中所需(xu)測(ce)定的(de)(de)(de)化合物(wu)(wu)的(de)(de)(de)含量。
凡具有芳(fang)香環或共軛雙(shuang)鍵(jian)結(jie)構的有機化合物,根據在(zai)特定吸(xi)收波長處所測(ce)得的吸(xi)收度(du),可用于藥品的鑒別、純度(du)檢查及含量測(ce)定。